Podaci denzitometrije generirani za Western blotove obično se koriste za poređenje obilja proteina između uzoraka. … Podaci nelinearne denzitometrije su uočeni kada su Western blotovi detektovani korišćenjem infracrvene fluorescencije ili hemiluminiscencije, i pod različitim uslovima SDS-PAGE.
Šta je denzitometrijska analiza?
Densitometrija je kvantitativno mjerenje optičke gustine u materijalima osjetljivim na svjetlost, kao što su fotografski papir ili fotografski film, zbog izlaganja svjetlosti.
Kako koristite denzitometriju na slici J?
Denzitometrija pomoću ImageJ
- Kliknite na centar kvadrata i prevucite ga do sljedeće trake. …
- Za poslednju traku, ponovite proceduru ali pritisnite Ctrl i 3 da postavite poslednju traku. …
- Koristite alat za crtanje linija da biste eliminisali pozadinu trake iz proračuna. …
- Idite na: Analyse→Gels→Label Peaks da dobijete izvještaj.
Kako analizirate western blot rezultate?
Provjerite svoje alate za kvantifikaciju . Na primjer, pokrenite mrlju gdje su trake napunjene sa 20 µg, 15 µg i 10 µg ukupnog proteina. Nakon analize, relativna kvantitacija ciljnih opsega bi trebala biti 2, 1,5 i 1. Probajte različite kvantitacijske alate i postavke dok ne budete mogli pouzdano da reprodukujete ispravne rezultate.
Kako kvantifikujete western blot?
Korak 1: Odredite pozadinu-oduzetugustoće vašeg proteina od interesa (PI) i normalizirajuće kontrole (NC). Korak 2: Identifikujte NC koji ima najveću vrijednost gustine. Korak 3: Podijelite sve NC vrijednosti sa najvećom vrijednošću NC gustoće da dobijete relativnu NC vrijednost.
