Kontrolna antitijela punjenja su važne kontrole jer ukazuju na jednako punjenje uzoraka u svim bunarima. Kontrole punjenja takođe ukazuju na pravilan transfer proteina na membranu tokom western blotting procesa. Kontrole punjenja su obično proteini sa visokom i sveprisutnom ekspresijom.
Šta radi kontrola punjenja?
Kontrola punjenja je protein koji se koristi kao kontrola u Western blotting eksperimentu. … Koriste se da bi se osiguralo da je protein jednako napunjen u svim bunarima.
Zašto koristimo kontrolu punjenja u Western blot-u?
Kontrole učitavanja imaju drugu ulogu kontrole u western blotovima. Mogu se koristiti da se provjeri da li je došlo do ravnomjernog prijenosa sa gela na membranu preko cijelog gela. Ovo je imperativ kada se prave poređenja nivoa ekspresije proteina između uzoraka.
Kako koristite kontrolu punjenja u Western blot-u?
Signali iz kontrola punjenja se obično koriste za normalizaciju signala od proteina od interesa. Da bi se koristila kontrola punjenja u ove svrhe, detekcija sa kontrolnim proteinskim antitijelom i eksperimentalnim antitijelom treba se obaviti na istom blotu. Različiti proteini se koriste kao kontrole punjenja.
Zašto se aktin koristi kao kontrola punjenja?
Beta-aktin, obično se koristi kao kontrola punjenja za Western Blot zanormalizovati detektovane nivoe proteina potvrđujući da je opterećenje proteina isto u celom gelu.
