Veoma je važno biti svjestan da se podaci proizvedeni western blot-om obično smatraju polu-kvantitativnim. To je zato što pruža relativno poređenje nivoa proteina, ali ne i apsolutnu mjeru količine.
Da li je western blot kvalitativan ili kvantitativan?
Western blot je pouzdana kvantitativna metoda samo ako se uzmu u obzir svojstva i integritet uzorka, specifičnost antitijela na ciljni protein i protokoli punjenja. Uz pažljivo obraćanje pažnje na detalje, možete izbjeći uobičajene greške i izbjeći pogrešno tumačenje Western blot podataka.
Koja vrsta metode je western blot?
Western blot je laboratorijska metoda koja se koristi za otkrivanje specifičnih proteinskih molekula iz mješavine proteina. Ova mješavina može uključivati sve proteine povezane s određenim tipom tkiva ili ćelije.
Može li se western blot kvantificirati?
Western blotovi se detektuju sa antitijela specifičnim na ciljni protein koji su poznati kao primarna antitijela. … Međutim, također je moguće koristiti Western blotting za obezbjeđivanje tačne kvantifikacije proteina u uzorcima, za procjenu promjena u nivoima ekspresije proteina (2).
Može li western blot kvantificirati proteine?
Nakon lize ćelija, važno je odrediti ukupnu koncentraciju proteina u uzorku. Precizna kvantifikacija uzorka će vam omogućiti da učitateodgovarajuća količina proteina u svakoj stazi.