Inkubirajte posudu na sobnoj temperaturi 2-3 minute . Čvrsto prianjajuće ćelije mogu se brzo odvojiti na 37 °C. Posmatrajte ćelije pod mikroskopom. Odvojene ćelije izgledaju zaobljene i refraktilne pod mikroskopom.
Šta će se desiti ako predugo probate ćelije?
Inkubiranje ćelija sa previsokom koncentracijom tripsina tokom predugog vremenskog perioda oštetiće ćelijske membrane i ubiti ćelije. Ako niste sigurni u koncentraciju tripsina koju treba koristiti, koristite nisku koncentraciju.
Kako probati ćelije?
Ćelije se mogu resuspendovati nežnim pipetiranjem suspenzije ćelija da se razbiju nakupine. Dalje razrjeđivanje se može izvršiti, ako je potrebno, radi brojanja ćelija i/ili subkulture.
Koliko je potrebno da se ćelije prikače?
prve ćelije se vežu nakon 3-5 min! Po mom iskustvu, većina EC-ova je pričvršćena nakon 10-20 minuta. Ali što duže čekate, veza je čvršća.
Da li je loše probati ćelije dva dana zaredom?
Da, štetno je ako tripsinizirate svoje ćelije kontinuirano nakon 24 sata od cijepanja. Preporučljivo je napraviti cijepanje nakon 48 sati razdvajanja. … Možete održavati ćelije dok morfologija ne bude dobra (Ovisi o tipu vaše ćelije, neke ćelije mogu imati do 80 prolaza, a neke do 10).
