Možete li pohraniti digestirani plazmid?

Možete li pohraniti digestirani plazmid?
Možete li pohraniti digestirani plazmid?
Anonim

Proizvod restriktivne probave može se lako pohraniti na -20 C. Na 4 C bilo bi u redu, ali da se osigura da nema aktivnosti i zvjezdane aktivnosti to je preporučuje se da se čuva na -20 C.

Kako čuvate probavljenu DNK?

Probajte čuvati krišku gela u frižideru preko noći, ili čak rastopiti krišku u puferu i zamrznuti je na -20°C ili -80°C. Degradacija DNK će se desiti istom brzinom i pod istim uslovima kao i rastvorljiva DNK, pa koristite hladniju temperaturu za duže skladištenje.

Šta znači da se plazmid probavi?

Pročišćena plazmidna DNK se digestira sa 1 ili više restrikcionih enzima (RE) odabranih da daju poseban uzorak DNK trake koji se lako razrješava elektroforezom. … Tipično se biraju restrikcijski enzimi koji seku unutar mjesta višestrukog kloniranja (MCS) i rezultiraju dijagnostičkim obrascem od 2-5 lako razriješivih traka.

Kako pohranjujete linearizirane plazmide?

Ako ste zabrinuti za nizvodne efekte TE, pohranite DNK u većoj koncentraciji i razblažite kada je potrebno, ili koristite "niski TE" koji iznosi 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. kada su DNK ili RNA čiste mogu se čuvati na -20C mnogo mjeseci bez ikakve degradacije.

Koliko dugo možete držati sažetak ograničenja?

Pro-Tip Ovisno o primjeni i količini DNK u reakciji, vrijeme inkubacije može varirati od 45 minuta do preko noći. Za dijagnostičke sažetke, 1-2 sata ječesto dovoljno. Za digeste sa >1 µg DNK korištene za kloniranje, preporučuje se varenje najmanje 4 sata.