Proteklih godina, Coriell je koristio sav serum inaktiviran toplinom za svoje ćelijske kulture da inaktivira protein komplementa koji se nalazi u serumu novorođenčeta teleta. Pošto smo prešli na fetalni goveđi serum, nalazimo da je toplotna inaktivacija nije neophodna za većinu ćelijskih linija.
Koliko dugo zagrijavate inaktivirate FBS?
Sljedeći protokol se predlaže za toplotnu inaktivaciju fetalnog goveđeg seruma (FBS). FBS se zagreva na 56±2°C tokom 30±2 minuta u vodenom kupatilu sa mešanjem. Inaktivacija toplote (HI) – proces kojim se FBS održava na temperaturi od 56±2° tokom 30±2 minuta.
Zašto je toplotna inaktivacija potrebna za FBS prije upotrebe?
Uobičajeni tretman FBS-a je toplotna inaktivacija, gdje se FBS zagrijava na 56°C 30 minuta u vodenom kupatilu uz povremeno protresanje. Svrha je deaktivirati sve komponente sistema komplementa koje su prisutne u FBS [24], i druge potencijalno nepoznate inhibitore rasta ćelija.
Zašto je potrebno zagrijati inaktivirati serum?
Cilj toplotne inaktivacije je uništavanje aktivnosti komplementa u serumu bez uticaja na karakteristike proizvoda za podsticanje rasta. Uklanjanje aktivnosti komplementa iz seruma nije potrebno za većinu ćelijskih kultura, ali može biti neophodno za kulture koje su osjetljive na aktivnost komplementa.
Kako skladištiti FBS inaktivirani toplinom?
Zaštitite odmrznuti FBS i druge serume sigurnim hlađenjem iskladištenje. Odmah koristite odmrznuti serum. Tečni FBS i drugi serum mogu se čuvati u hladnjaku (2 do 8 °C) do četiri sedmice.