Što je veća molekulska težina, to je kalem duži i molekul sporije ide. Dakle, elektroforeza + SDS se razdvaja na osnovu molekularne težine, a ne na osnovu prirodnog naboja. Važna napomena: Proteini iste dužine obično se ne mogu razdvojiti gel elektroforezom + SDS.
Kako razdvojiti proteine iste molekularne težine?
Centrifugiranje, elektroforeza i hromatografija su najčešće tehnike za pročišćavanje i analizu proteina. Centrifugiranje odvaja proteine na osnovu njihove brzine taloženja, na koju utiču njihova masa i oblik.
Koje tehnike razdvajaju proteine na osnovu naplate?
Proteini se mogu razdvojiti na osnovu njihovog neto naboja jono-izmjenjivačkom hromatografijom. Ako protein ima neto pozitivan naboj pri pH 7, obično će se vezati za kolonu kuglica koje sadrže karboksilatne grupe, dok negativno nabijeni protein neće (slika 4.4).
Koja od sljedećih tehnika je najprikladnija za odvajanje proteina na osnovu molekularne težine?
Metode hromatografije zasnovane na particiji su veoma efikasne u razdvajanju i identifikaciji malih molekula kao što su aminokiseline, ugljeni hidrati i masne kiseline. Međutim, afinitetne hromatografije (tj. hromatografija sa izmenom jona) su efikasnije u odvajanju makromolekula kao što su nukleinske kiseline i proteini.
Koja vrsta kolonehromatografija razdvaja proteine na osnovu molekularne težine?
Gel filtracija (GF) hromatografija razdvaja proteine isključivo na osnovu molekularne veličine. Odvajanje se postiže korištenjem porozne matrice kojoj molekuli, iz steričnih razloga, imaju različite stupnjeve pristupa-tj. manji molekuli imaju veći pristup, a veći molekuli su isključeni iz matrice.
