Međutim, kada se spektri emisije preklapaju, može se detektovati fluorescencija iz više od jednog fluorohroma. Da bi se ispravilo ovo spektralno preklapanje, koristi se proces kompenzacije fluorescencije. Ovo osigurava da fluorescencija otkrivena u određenom detektoru proizlazi iz fluorohroma koji se mjeri.
Zašto nam je potrebna kompenzacija u protočnoj citometriji?
Kompenzacija je potrebna za eksperiment protočne citometrije zbog fizike fluorescencije. Fluorohrom se pobuđuje i emituje foton u opsegu talasnih dužina. Neki od tih fotona se prosu u drugi detektor, uzrokujući da pojedinačni obojeni uzorci izgledaju dvostruko pozitivni.
Koja je glavna svrha korištenja kompenzacijske ćelije?
Primarna svrha je da se omogući mjerenje prave fluorescencije u primarnom kanalu kontaminiranom prelivanjem iz susjednih fluorofora. Prema tome, kompenzacija ispravlja fluorescencijski „prestup“između fluorofora. Međutim, nije savršen i ne može popraviti sve neželjene efekte.
Šta je matrica kompenzacije?
Matrica kompenzacije je izračunata korištenjem jednobojnih fluorescentnih kontrolnih fajlova koji se prikupljaju na ImageStream ili FlowSight sa svim prikupljenim kanalima iu odsustvu svijetlog polja ili SSC.
Šta je spektralna kompenzacija?
Upotreba spektrakompenzacija znači da se signal iz neprimarnih detektora i dalje koristi za poboljšanje pravog signala markera gdje je to moguće. Primarni kontrolni uzorci se koriste za imenovanje parametara. … Uzorci koji se koriste za primarne detektore također pomažu da se ti parametri imenuju nakon spektralne kompenzacije.
